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感染動物実験における安全対策

国立大学動物実験施設協議会
1987年5月 制定
2000年6月2日改訂
2001年5月25日改訂
医学生物学研究における実験動物への病原体の感染実験を対象とする。これと同様の危険性が考えられるものとして、病原性の高い病原体に自然感染し病原体を排泄する可能性が考えられる実験動物、特に野生動物を取り扱う場合も対象とする。
安全度は1-4に分ける。これは人に対する危険性から分類されたものであって、試験管内実験におけるクラス1-4にほぼ相当する。実験動物間での伝播に特に注意を要する環境での実験、すなわち、病原体による同居感染の可能性があるため、他の正常動物との隔離を特に必要とする場合には1ランク上げるものとする。(分類表中アスタリスク[*]で示す)。
安全度1:人に対して病原性をほとんど示さず、人の実験室感染及び実験動物間での同居感染の可能性がほとんどないもの。
安全度2:以下の条件の何れかに該当するもの。
  • 通常の病原微生物学的設備および操作手順で人への実験室感染を防ぐことが可能であるもの。
  • 実験動物に感染し、病原性を示したり、動物実験成績への影響の可能性があるもの。
安全度3:以下の条件の何れかに該当するもの。
  • 通常の病原微生物学的設備および操作手順で人への実験室感染を確実に防ぐことが出来るが、感染発病した場合には重症になる可能性のあるもの。
  • 人への実験室感染の可能性が高く、感染発病した場合、重症になる可能性があるもので、有効な予防法または治療法の存在するもの。
  • 実験動物に感染する病原体で、感染性や病原性が強く、感染した場合には動物実験への影響が大きいもの。
安全度4:人への実験室感染の可能性が高く、感染した場合、重症になる可能性のあるもので有効な予防法又は治療法が存在しないもの。
標準操作手順及び設備基準
[安全度1]
標準操作手順
  • 感染実験区域内への飲食物の持込みまたは喫煙を禁止する。
  • 動物飼育室内に手洗い装置を設け、作業後は手指の洗浄消毒を行う。
  • 作業時には、マスク、帽子及びゴムまたはプラスチック製手袋を着用する。
  • 床敷交換などの作業時のエアロゾル発生を極力防ぐ。
  • 使用済みケ-ジ等汚染器材は消毒または滅菌したのち洗浄する。
  • 汚染床敷や動物由来排泄物は消毒または滅菌したのち廃棄する。
  • 動物死体は焼却する。
  • 動物飼育室内では専用の作業衣、長靴などを着用する。
  • 動物実験関係者以外の立ち入りを制限する。
安全設備
  • 動物の飼育は脱出防止装置の付いたケ-ジ内でおこなう。
動物飼育室の構造
  • 感染実験区は他の区域と区別し、昆虫及びげっ歯類の侵入を防止する。
  • 床、壁には耐水性でかつ消毒薬耐性の素材を用いる。
  • その他は非感染動物飼育室の構造に準じる。
[安全度2]
標準操作手順
安全度1の手順に以下を加える。
  • 使用済みのケ-ジなど汚染器材や動物死体は高圧蒸気滅菌を行ったのち洗浄または焼却する。
安全設備
単純飼育時
  • マウス、ラットの飼育にはケージにフィルターキャップをかぶせたり、あるいは感染動物用アイソレ-タ(A形、B形)内で行う。
飼育管理作業時及び接種・解剖作業時
  • 高濃度のエアロゾルを発生する作業は、クラスI、II形生物学用安全キャビネットおよび感染動物用安全キャビネット、または感染動物用アイソレ-タ(A形、B形)内でおこなう。
その他
  • 感染実験区域内に高圧蒸気滅菌装置を設置する。
動物飼育室の構造
  • 安全度1に準じる。
[安全度3]
標準操作手順
安全度2の操作手順に以下を加える。
  • 動物飼育は原則として実験担当者が行う。
安全設備
単純飼育時
  • 動物の飼育は感染動物用安全キャビネットまたは感染動物用アイソレ-タ(A形)内でおこなう。
飼育管理作業時及び接種・解剖作業時
  • クラスI、II 形生物学用キャビネットおよび感染動物用安全キャビネット、または感染動物用アイソレ-タ(A形)内でおこなう。
その他
  • 安全度2に準じる。
動物飼育室の構造
  • 動物飼育室の窓は非開閉式にする。
  • 動物飼育室内は陰圧に保ち、準備室、飼育前室から動物飼育室内へ空気が流入する一定方向気流方式の空調を行う。
  • 非常用電源の確保や逆流防止ダンパーの設置により、停電時の空気の逆流防止対策を考慮する。
  • 動物飼育室からの排気は高性能フィルタで濾過したのち放出する。
  • 感染実験区域の入口にはエアロックまたは二重ドアを設置する。
  • 配管貫通部を塞ぎ、動物飼育室内のホルマリンガスによる燻蒸消毒が可能な密閉構造とする。
[安全度4]
標準操作手順
安全度3の操作手順に以下を加える。
  • 隔離区域から出る際にはシャワ-を浴びる。
安全設備
単純飼育時、飼育管理作業時、及び接種・解剖作業時
  • 動物飼育実験はすべて完全密閉のグロ-ブボックス型安全キャビネット内で行う。この安全キャビネットには両面高圧蒸気滅菌装置、消毒薬槽(ダンクタンク)及び二重扉の器材搬出入口を設ける。
  • 使用済みケ-ジ、器材、実験試料、動物死体はすべてグロ-ブボックス型安全キャビネットに取り付けた両面高圧蒸気滅菌装置で滅菌したのち取り出す。動物死体はさらに焼却する。
  • 病原体試料は完全密閉の小型容器にいれ、消毒薬槽を通して表面を消毒したのち取り出す。
  • 動物や試料の搬入は器材搬出入口を通して行う。この際、二重扉間の空気は過酢酸等で滅菌する。
  • 実験室とサポ-ト域の間に実験器材の搬出入用として両扉高圧蒸気滅菌装置及び両扉ガス(エチレンオキサイドまたはホルマリン)滅菌装置を設ける。
動物飼育室の構造
  • 独立した建物として、隔離域とそれを取り囲むサポ-ト域を設ける。
  • 壁、床、天井はすべて耐水性かつ気密性のものとし、これらを貫通する部分(給排気管、電気配線、ガス、水道管等)も気密構造とする。
  • 作業者の出入口には、エアロックとシャワ-をもうける。
  • 実験室内の気圧には隔離の程度に応じて差を設け、高度の隔離域から低度の隔離域へ、また低度の隔離域からサポ-ト域へ空気が流出しないようにする。
  • 実験室への給気は、1層のHEPAフィルタを通す。実験室からの排気は2層のHEPAフィルタを通して外部に出す。この排気滅菌装置は予備を含めて2組設け、さらにその場において滅菌可能な構造とする。
  • 実験室からの研究排水は 120℃加熱滅菌し、冷却したのち、一般下水へ放出する。
動物実験における病原体の安全度分類
注)本分類は参考資料としてまとめたものであり、その運用に当たっては各大学のバイオセフティ委員会や動物実験施設関係者等の協議により、判断するものとする。(アンダーライン:主に実験動物に感染する病原体 *:正常動物との隔離を特に必要とする場合には1ランク上げる)

ウイルス

Class 1

   Live vaccine virus (Vaccinia, Rabies, Rinderpest vaccineを除く)

Class 2

BK

Batai

Borna

Bunyamwera

California encephalitis

Canine adeno (Infectious canine hepatitis)

Canine distemper

Canine parvo

Cavid herpes 1(Guinea pig cytomegalo)

Cowpox

Coxsackie (全型)

Dengue (全型)

Echo (全型)

Ectromelia (Mouse pox) *

Encephalomyocarditis (EMC)

Entero (68, 69, 70, 71)

Epstein-Barr (EB)

Feline calici

Feline immunodeficiency

Feline infectious peritonitis

Feline leukemia

Feline panleukopenia

Feline rhinotrachitis

Gibbon ape lymphosarcoma

Hepatitis (A, B, C, D, E)

Herpes papio

Herpes saimiri

Herpes simplex (1, 2)

Human Parvo

Human Rhino

Human Rota

Human T-cell leukemia -lymphoma (HTLV 1, 2)

Human adeno

Human astro

Human calici

Human corona

Human cytomegalo

Human herpes (6, 7, 8)

Human papilloma

Influenza (A, B, C)

JC

Japanese encephalitis

Kilhams rat

La Crosse

Lactate dehydrogenase-elevating (LDV)

Langat

Measles (SSPEを含む)

Minute virus of mice (MVM)

Monkey pox *

Mouse adeno

Mouse cytomegalo

Mouse encephalomyelitis (TMEV)

Mouse hepatitis *

Mouse polyoma

Mouse rota(EDIM)

Mouse thymic

Mumps

Murine leukemia

Myxoma *

Newcastle disease

Orbi

ONnyong-Nnyong

Parainfluenza(1-Sendai*, 2, 3, 4)

Pneumonia virus of mice(PVM)

Polio (1, 2, 3)

Prion disease agents (Creutzfeldt-Jakob, BSE, Scrapie)

Rabbit hemorrhagic disease *

Rabbit parvo

Rabbit pox

Rabbit rota

Rat cytomegalo

Rabies (fixed, live vaccine)

Reo

Respiratory syncytial (RS)

Rinderpest (vaccine strain)

Rio Bravo

Rubella

Sendai (HVJ)*

Sialodacryoadenitis(rat corona)

Simian immunodeficiency (SIV)

Sindbis

Vaccinia

Varicella -Zoster

Vesicular stomatitis

Woodchuck hepatitis

Wooly monkey lymphosarcoma

Yaba monkey tumor pox

 

Class 3

Chikungunya

Colorado tick fever

Eastern equine encephalomyelitis

Hanta (Hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) )

Herpes ateles

Human immunodeficiency (HIV 1,2)

Kyasanur forest disease

Lymphocytic choriomeningitis (LCM)

Mayaro

Murray valley encephalitis

Negishi

Powassan

Rabies (street strain)

Rift valley fever

Russian Spring-Summer encephalitis

Semliki forest

St. Louis encephalitis

Tacaribe

Tanapox

Tick-borne encephalitis

Venezuelan equine encephalitis (VEE)

Western equine encephalitis (WEE)

West Nile fever

 

Class 4

Crimean Congo hemorrhagic fever

Ebola

Hanta (Hantavirus pulmonary syndrome (HPS))

Herpes B **

Junin

Lassa fever

Machupo

Marburg disease

Variola (major,minor)

Yellow fever (17D vaccine strainを除く)

** : Bウイルスの診断のため、少量の培養を含む検査は安全度3の設備で実施できるとの見解が、国立感染症研究所の病原体等安全管理規程に示されている。

 

 

細菌およびマイコプラズマ

(ここにない細菌およびマイコプラズマの分類は、日本細菌学会バイオセフティ指針を参考にする)

 

Class1

Class2およびClass3に属さない細菌

Class 2あるいはClass 3に近縁種がある場合は、それを参考にして判断する)

 

Class 2

Actinomadura madurae

Actinomadura pelletieri    

Actinomyces bovis

Actinomyces israelii

Actinomyces pyogenes

Actinomyces viscosus

Aeromonas hydrophila(毒素原性株)

Aeromonas sobria(毒素原性株)

Bacillus cereus(毒素原性株)

Bordetella bronchiseptica

Bordetella parapertussis

Bordetella pertussis

Borrelia (全菌種)

Burkholderia cepacia

Calymmatobacterium granulomatis

Campylobacter coli

Campylobacter jejuni

Chlamydia pneumoniae

Chlamydia trachomatis

Cilia-associated respiratory(CAR) bacillus

Clostridium botulinum

Clostridium difficile

Clostridium haemolyticum

Clostridium histolyticum

Clostridium novyi

Clostridium perfringens(毒素原性)

Clostridium piliforme (Tyzzer's organism) *

Clostridium septicum

Clostridium sordelli

Clostridium sporogenes

Clostridium tetani

Corynebacterium diphtheriase

Corynebacterium jeikeium

Corynebacterium kutscheri *

Corynebacterium pseudodiphtheriticum

Citrobacter freundii

Citrobacter rodentium(Escherichia coli O115a,c;K(B))

Erysipelothrix rhusiopathiae

Escherichia coli (E.coli,K12株,B株並びにその誘導体を除く)

Francisella novicida

Fusobacterium necrophorum

Haemophilus(Actinobacillus) actinomycetemcomitans

Haemophilus ducreyi 

Haemophilus influenzae

Helicobacter hepaticus 

Helicobacter pylori

Klebsiella oxytoca

Klebsiella pneumoniase

Legionella 全菌種(Legionella-like organismsを含む)

Leptospira interrogans全血清型

Listeria monocytogenes

Moraxella (Branhamella) catarrhalis

Mycobacterium avium

Mycobacterium chelonae

Mycobacterium fortuitum

Mycobacterium haemophilum

Mycobacterium intracellulare

Mycobacterium kansasii

Mycobacterium leprae

Mycobacterium ulcerans

Mycobacterium lepraemurium

Mycobacterium malmoense

Mycobacterium marinum

Mycobacterium paratuberculosis

Mycobacterium scrofulaceum

Mycobacterium simiae

Mycobacterium szulgai

Mycobacterium xenopi

Mycoplasma arthritidis

Mycoplasma hominis

Mycoplasma neurolyticum

Mycoplasma pneumoniae

Mycoplasma pulmonis *

Neisseria gonorrhoeae

Neisseria meningitidis

Nocardia asteroides

Nocardia brasiliensis

Nocardia farcinica

Nocardia otitidiscaviarum

Pasteurella multocida (動物に疾病をおこす血清型(Class 3 )を除く)

Pasteurella pneumotropica

Plesiomonas shigelloides 

Pseudomonas aeruginosa

Salmonella (Class 3 を除く全血清型) *

Serattia marcescens

Shigella 全菌種

Staphylococcus aureus

Streptobacillus moniliformis

Streptococcus pneumoniase

Streptococcus pyogenes

Streptococcus zooepidemicus *

Treponema carateum

Treponema cuniculi

Treponema pallidum subsp. pallidum

Treponema pallidum subsp. pertenue

Vibrio cholerae

Vibrio fluvialis

Vibrio mimicus

Vibrio parahaemolyticus

Vibrio vulnificus

Yersinia enterocolitica

Yersinia pseudotuberculosis

 

Class 3

Bacillus anthracis

Brucella (全菌種)

Burkholderia mallei

Burkholderia pseudomallei

Chlamydia psittaci

Coxiella burnetii

Ehrlichia canis

Ehrlichia sennetsu

Francisella tularensis

Mycobacterium africanum

Mycobacterium bovis

Mycobacterium tuberculosis

Orientia tsutsugamushi

Pasteurella multocida (動物に疾病を起こす血清型:B:6, E:6, A:5, A:8, A:9)

Rickettsia spp.

Salmonella serovar paratyphi A

Salmonella serovar typhi

Yersina pestis

 

真菌

 

Class 1

Class 2およびClass 3に属さない真菌

(Class 2あるいはClass 3に近縁種がある場合は、それを参考にして判断する)

 

Class 2

Acremonium kiliense

Allescheria boydii

Arachnia propionica

Aspergillus fumigatus

Aspergillus spp. (毒素産生株)

Candida albicans 

Chaetomium spp. (毒素産生株)

Cladosporium carrionii

Cladosporium trichoides (C. bantianum)

Cryptococcus neoformans

Curvularia geniculata

Dreschslera apiciferum

Expophiala dermatitidis

Fonsecaera pedrosoi

Fusarium spp. (毒素産生株)

Leptosphaeria senegalensis

Madurella grisea

Madurella mycetomii

Microsporum canis

Microsporum gypseum

Mucor sp.

Myrothecium spp. (毒素産生株)

Neotestudina rosatii

Penicillium spp. (毒素産生株)

Phialophora jeanselmei

Pneumocystis carinii * (従来、protozoaとされてきたが、真菌だとする場合もある)

Pyrenochaeta romeroi

Rhizopus sp.

Sporothrix schenckii

Trychophyton mentagrophytes

Trychophyton schoenleinii

Trychophyton simii

Trychophyton verrucosum

 

Class 3

Blastomyces dermatitidis

Coccidioides immitis

Cryptococcus neoformans

Histoplasma capsulatum

Histoplasma duboisii

Histoplasma farciminosum

Paracoccidioides brasiliensis

Penicillium marneffei

 

寄生虫

 

Class 1

Class2およびClass 3に属さない原虫類、吸虫類、条虫類および線虫類

(Class 2あるいはClass 3に近縁種がある場合は、それを参考にして判断する)

 

Class 2

   Protozoa

Babesia spp. (ookinete)

Balantidium coli (cyst)

Cryptosporidium spp. (oocyst)

Eimeria spp. (oocyst) 

Encephalitozoon (Nosema) cuniculi (spore)

Giardia spp. (trophozoite, cyst)

Leishmania spp. (promastigote, amastigote) (レベル3に示すものを除く)

Neospora caninum (cyst)

Pentatrichomonas hominis (trophozoite)

Pneumocystis carinii (cyst) * (従来、protozoaとされてきたが、真菌だとする場合もある)

Sarcocystis spp. (sporocyst, gametocyte)

Spironucleus muris(trophozoite, cyst)

Trichomonas vaginalis (trophozoite)

 

   Trematoda

Centrocestus spp. (metacercaria)

Clonorchis sinensis (metacercaria)

Dicrocoelium dendriticum (metacercaria)

Echinostoma spp. (metacercaria)

Echinochasmus perfoliatus (metacercaria)

Fasciola hepatica (metacercaria)

Fasciolopsis buski (metacercaria)

Gigantobilharzia spp. (cercaria)

Heterophyes heterophyes (metacercaria)

Metagonimus yakogawai (metacercaria)

Opistorchis spp. (metacercaria)

Paragonimus spp. (metacercaria)

Plagiorchis muris (metacercaria)

Trichobilharzia spp. (cercaria)

 

   Cestoda

Bertiella studeri (cysticercoid)

Diphyllobothrium latum (plerocercoid)

Dipylidium spp. (cysticercoid, procercoid, plerocercoid)

Diplogonoporus grandis (plerocercoid)

Hymenolepis diminuta (cysticercoid)

Raillietina celebensis (cysticercoid)

Taenia spp. (egg, cysticercus)  (レベル3に示すものを除く)

Vampirolepis (Hymenolepis) nana (egg, cysticercoid)

 

   Nematoda

Ancylostoma spp. (larva)

Anisakis spp. (larva)

Ascaris lumbricoides (egg)

Aspiculuris tetraptera (egg)

Brugia spp. (larva)

Capillaria hepatica (egg)

Dirofilaria spp. (larva)

Dracunculus medinensis (larva)

Enterobius vermicularis (egg)

Gnathostoma spp. (larva)

Loa loa (larva)

Mansonella perstans (larva)

Necator americanus (larva)

Onchocerca volvulus (larva)

Pseudoterranova decipiens (larva)

Rhabditis spp. (larva)

Syphacia spp. (larva)

Thelazia callipaeda (larva)

Toxocara spp. (egg)

Trichostrongylus orientalis (larva)

Trichuris trichiura (egg)

Wuchereria bancrofti (larva)

 

Class 3

Protozoa

Acanthamoeba (Hartmannella) culbertsoni (trophozoite, cyst)

Entamoeba histolytica (cyst)

Leishmania donovani (promastigote, amastigote)

Leishmania braziliensis (promastigote, amastigote)

Naegleria fowleri (trophozoite, cyst)

Plasmodium falciparum (erythrocytic stage, sporozoite)

Plasmodium malariae (erythrocystic stage, sporozoite)

Plasmodium ovale (erythrocystic stage, sporozoite)

Plasmodium vivax (erythrocystic stage,sporozoite)

Simian malarial parasites (erythrocystic stage, sporozoite)

Toxoplasma gondii (tachyzoite, bradyzoite, oocyst)

Trypanosoma spp. (trypomastigote, amastigote)

 

   Trematoda

Schistosoma spp.(cercaria)

 

   Cestoda

Echinococcus spp. (egg, hydatid sand)

Taenia solium (egg)

 

   Nematoda

Angiostrongylus spp. (larva)

Baylisascaris procyonis (egg)

Capillaria philippinensis (larva)

Strongyloides spp. (larva)

Trichinella spiralis (larva)